毛細管柱氣相色譜法測定中草藥中8 種有機氯農(nóng)藥殘留

有機氯農(nóng)藥是一類曾被世界廣泛適用的廣譜殺蟲劑。其中六六六( HCH) 和滴滴涕(DDT) 使用時間長,用量大,范圍廣,雖已禁用多年,由于其脂溶性、半衰期長和難降解的特性,長期積存在環(huán)境中,尤其是在土壤中含量較高 ,進而遷移至植物、蔬菜,中草藥中。近年來,回歸自然的潮流使人們對綠色藥品更為關注,世界各國對天然藥物的需求日益擴大,但自上個世紀以來,中草藥的農(nóng)藥殘留,特別是有機氯的殘留已成為我國中草藥走向國際市場的主要障礙,因此,使我國中草藥有機氯農(nóng)藥的研究標準化、規(guī)范化具有十分重要的意義。我國已經(jīng)制定了果蔬、食品及油脂中HCH 和DDT 的國標檢測方法和限量標準,而中草藥農(nóng)藥殘留的國標檢測方法和限量標準還很少 。本研究通過對人參、丹參、甘草桔梗等植根類中藥有機氯測定,建立了毛細管柱氣相色譜法測定4 種中草藥中8 種有機氯農(nóng)藥殘留方法,為中草藥中農(nóng)藥殘留檢測提供有效的分析方法。

1 　實驗部分

1. 1 　主要儀器與試劑　GC - 6820 氣相色譜儀配ECD 檢測器,DB - 5 石英毛細管柱(30. 00m ×0. 32mm ×0. 25m) 。DDT 和HCH 標準品;取DDT 和HCH 混合標準品(含4 種滴滴涕異構體及4 種六六六異構體) ,先用正己烷溶解配成100μg/ L 的儲備液,臨用時再用正己烷逐步稀釋,配制成標準工作液。丙酮、石油醚及正己烷均為色譜純,無水硫酸鈉(650 ℃灼燒5h) ,氯化鈉(120 ℃烘4h) ,氟羅里硅土(120 ℃烘4h) ,固體試劑冷卻后均于干燥器中保存。測土儀，（測量土壤中養(yǎng)分的含量，如氮、磷，這些也是農(nóng)殘殘留的一方面）。土壤溫濕度記錄儀。

1. 2 　實驗方法

1. 2. 1 　樣品預處理　準確稱取已充分粉碎的樣品5g 于250ml 三角燒瓶中,加入萃取劑100ml (正己烷40ml + 石油醚40ml + 丙酮20ml ) , 浸泡4h , 在搖床中震搖1h , 超聲提取30min ,經(jīng)玻璃砂芯漏斗過濾,靜置分層。轉移上層有機相,并使其通過10cm 高無水硫酸鈉玻璃小柱,并用正己烷少量多次潤洗,80 ℃水浴蒸發(fā)至2ml ,待凈化。

1. 2. 2 　樣品的凈化　在玻璃層析柱中加入2cm 高的無水硫酸鈉,8g 氟羅里硅土,再加入2cm 高的無水硫酸鈉,敲實。取20ml 正己烷倒入層析柱中潤濕吸附柱, 待正己烷接近上層無水Na2 SO4 時,將濃縮液轉移至層析柱中, 并用正己烷洗滌濃縮瓶3 次,洗滌液并入層析柱中,收集凈化液, 待濃縮液接近上層無水硫酸鈉時, 以正己烷∶丙酮( 9 ∶1) 淋洗層析柱,并入濃縮瓶中80 ℃水浴蒸發(fā)近干,用正己烷定容至1ml ,供氣相色譜分析。

1. 2. 3 　色譜條件　進樣口溫度250 ℃, 電子捕獲檢測器溫度300 ℃,載氣、輔助氣均為高純氮氣,純度99. 999 % ,載氣流速:2. 0ml/ min ,進樣方式:不分流進樣,色譜柱升溫程序:柱溫150 ℃維持4min ,再由8 ℃/ min 升至220 ℃,保持12min ,再由20 ℃/ min 升至270 ℃,保持5min。進樣量1μl 。

2 　結果

2. 1 　線性范圍與檢出限　用正己烷將100μg/ ml 的儲備液分別稀釋成不同質量濃度的標準溶液進行實驗,并繪制標準曲線,試驗結果表明,被測組分質量濃度在0. 01～5. 00μg/ ml的范圍內(nèi)與其色譜峰面積呈線性關系。HCH 和DDT 8 種組分的線性回歸方程、相關系數(shù)及方法檢出限(S/ N = 3) 見表1

2. 2 　方法加標回收率及精密度　在優(yōu)化后的色譜條件下進行日內(nèi)和日間精密度試驗。分別取低、中、高三種濃度的標準液,每種濃度在1d 中測試6 次,得日內(nèi)精密度(RSD) 在3. 1 %

～5. 4 %之間,同樣3 種濃度內(nèi)日測試1 次,連續(xù)測試6d ,得日間精密度在4. 5 %～9. 6 %之間。平行取7 份相同中草藥樣品(桔梗) 分別加入二種濃度的混標溶液,由于中草藥中有機氯的含量較低,因此選低中二個濃度進行加標回收試驗, ,然后按試驗方法進行提取、凈化及氣相色譜測定( n = 7) ,結果見表2 。

2. 3 　樣品的測定　準確稱取4 種中草藥,按“1. 2”項處理,以外標法定量,測得農(nóng)藥殘留結果見表3 ,8 種有機氯標準及樣品色譜圖見圖1 。

3 　結論

本文建立了4 種植根類中草藥中8 種有機氯農(nóng)藥殘留的氣相色譜測定方法,方法操作簡便,準確度高。從測定結果看,8 種有機氯農(nóng)藥殘留在這四種草藥中均有檢出。其中β- HCH 含量最高,P , P′- DDD 最低,參考2000 版藥典中對黃芪甘草項下對HCHs 和DDTs 的限量標準 ,檢測的4 種中草藥樣品有機氯殘留均未超標。