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飼料中粗蛋白的測定過程解析
來源: 本站 類別:技術(shù)文章 更新時(shí)間:2014-02-07 閱讀次
1.粗蛋白的測定原理:
凱氏法測定試樣中的含N量,即在催化劑作用下,用H2SO4破壞有機(jī)物,使含N物轉(zhuǎn)化成(NH4)2SO4,加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,測出N含量,將結(jié)果乘以換算系數(shù)6.25,計(jì)算出CP含量。
2.粗蛋白的測定材料與器具:
粗蛋白的測定需要使用到的儀器有:H2SO4、混合催化劑、NaOH、硼酸、混合指示劑、HCl標(biāo)準(zhǔn)液、蔗糖、硫酸銨、硼酸吸收液
粗蛋白的測定儀器設(shè)備:粉碎機(jī)、分樣篩、分析天平、消化爐、滴定管、全自動(dòng)定氮儀、錐形瓶、容量瓶、消煮管
3.粗蛋白的測定方法步驟
1、試樣的消煮,稱取試樣0.5g,準(zhǔn)確至0.0202g,放入消煮管中加入6.4g混合催化劑與試樣混合均勻,再加入12ml H2SO4將消煮瓶置于電爐上加熱,開始小火,待樣品焦化、泡沫消失后,再加強(qiáng)火力(360-410℃)直至透明的藍(lán)綠色,然后再繼續(xù)加熱至少2h。
2、NH3的蒸餾
將試樣消煮液冷卻,加入20ml蒸餾水,轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中,冷卻后用水稀釋至刻度,搖勻,作為試樣分解液。將半微量蒸餾裝置的冷凝管末端浸入裝有20ml硼酸吸收液和2滴混合指示劑的錐形瓶內(nèi)。蒸汽發(fā)生器的水中應(yīng)加入甲基紅指示劑數(shù)滴,硫酸數(shù)滴,在蒸餾過程中保持此液為橙紅色,否則需補(bǔ)加硫酸。準(zhǔn)確移取試樣分解液10-20ml注入蒸餾裝置的反應(yīng)室中,用少量蒸餾水沖洗進(jìn)樣入口,塞好入口玻璃塞,再加入10ml氫氧化鈉溶液,小心提起玻璃塞使之流入反應(yīng)室,將玻璃塞塞好,且在入口處加水密封,防止漏氣。蒸餾4min降下錐形瓶使冷凝管末端離開吸收液面,再蒸餾1min,用蒸餾水沖洗冷凝管末端,洗液均需流入錐形瓶內(nèi),然后停止蒸餾。
3、滴定
蒸餾后的吸收液用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛壹t色為終點(diǎn)。
4、空白測定
稱取蔗糖0.5g代替試樣進(jìn)行空白測定
5、計(jì)算
CP=
V2:滴定試樣時(shí)所需標(biāo)準(zhǔn)溶液體積ml
V1:滴定空白時(shí),所需標(biāo)準(zhǔn)溶液體積ml
C:鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度mol/l
M:試樣質(zhì)量 g
0.0140:與1mol HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)?shù)囊詆表示的N的質(zhì)量。
6.25:N換算成CP的平均系數(shù)。
6、重復(fù)性
每個(gè)試樣的平行樣進(jìn)行測定,以其算術(shù)平均什為結(jié)果。
當(dāng)粗蛋白質(zhì)在25%以上時(shí),允許相對(duì)偏差為1%;
當(dāng)粗蛋白質(zhì)在10%~25%之間時(shí),允許相對(duì)偏差為2%;
當(dāng)粗蛋白質(zhì)在10%以下時(shí),允許相對(duì)偏差為3%。
飼料是家畜成長的營養(yǎng)來源,飼料中蛋白質(zhì)含量的高低,直接決定了家畜的質(zhì)量高低。因此,飼料中蛋白質(zhì)的含量測定是一個(gè)很重要的步驟。而蛋白質(zhì)存在于一切動(dòng)植物體中,是一切生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。家畜從飼料中攝取蛋白質(zhì)及其分解產(chǎn)物,以組成自身的蛋白質(zhì),因此,飼料中蛋白質(zhì)含量的分析就成為評(píng)價(jià)飼料營養(yǎng)價(jià)值的主要指標(biāo)。
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