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粗蛋白測量方法
什么是粗蛋白, 粗蛋白跟蛋白質又有什么區(qū)別,如何測量飼料中粗蛋白的含量,粗蛋白的含量高是不是一定代表著蛋白質的含量高。我想,當你看到這個題目時,肯定會聯(lián)想到這一連串的問題中的其中幾個。那么接下來,我就來詳細介紹下粗蛋白的概念、粗蛋白測量和其他關于飼料中粗蛋白含量的問題。
粗蛋白概念:
粗蛋白不僅包括蛋白質這一物質,它涵蓋的范圍更廣,包括含氮的全部物質。包括真蛋白質和含氮物(氨化物)。食物中粗蛋白含量以大豆最高,肉類次之。粗蛋白英文為crude protein。粗蛋白是食品、飼料中一種蛋白質含量的度量。由于一般蛋白質中含氮量約為16%,故在概略分析中,常用凱氏(Kjeldahl)法測出總氮量,再乘以系數6.25來求得。實際上,它是食品、飼料中含氮化合物的總稱,既包括真蛋白又包括非蛋白含氮化合物,后者又可能包括游離氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸鹽和氨等。此外,不同蛋白質的氨基酸組成不同,其氮含量不同,總氮量換算成蛋白質的系數也不同,如小麥和多數谷物的換算系數為5.80,水稻5.95,大豆5.7,多數食用豆和堅果5.3,牛奶6.38等。粗蛋白只是一個粗略的概念。
粗蛋白含量:
下面我介紹幾種常見物質的粗蛋白含量,僅供大家參考。
薏苡仁 粗蛋白含量:13%-14%
棉粕 粗蛋白含量:可達40%以上
農大白早糯玉米 粗蛋白含量:3.41%
蠡玉168 粗蛋白含量:9.63%
臺灣大青棗 粗蛋白含量:0.86%
上文介紹了幾種農產品或水果的粗蛋白含量情況,如果需要更多的資料,大家可自己查閱。
粗蛋白測定:
方法一:最簡便也是最快鍵的方法,就是用蛋白質測定儀(參見m.askacustomsbroker.com/product/993.html)來測量。
本標準參照采用ISO 5983—1979 《動物飼料──氮含量的測定和粗蛋白含量計算》。
1 主題內容與適用范圍
本標準規(guī)定了飼料中粗蛋白含量的測定方法。
本標準適用于配合飼料、濃縮飼料和單一飼料。
2 引用標準
GB 601 化學試劑 滴定分析(容量分析)用標準溶液的制備
3 原理
凱氏法測定試樣中的含氮量,即在催化劑作用下,用硫酸破壞有機物,使含氮物轉化成硫酸銨。加入強堿進行蒸餾使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,測出氮含量,將結果乘以換算系數6.25,計算出粗蛋白含量。
4 試劑
4.1 硫酸(GB 625):化學純,含量為98%,無氮。
4.2 混合催化劑:
4.3 氫氧化鈉(GB 629):化學純,40%水溶液(m/V)。
4.4 硼酸(GB 628):化學純,2%水溶液(m/V)。
4.5 混合指示劑:甲基紅(HG 3—958)0.1%乙醇溶液,溴甲酚綠(HG 3—1220)0.5%乙醇溶液,兩溶液等體積混合,在陰涼處保存期為三個月。
4.6 鹽酸標準溶液:鄰苯二甲酸氫鉀法標定,按GB 601制備。
4.7 蔗糖(HG 3—1001):分析純。
4.8 硫酸銨(GB 1396):分析純,干燥。
4.9 硼酸吸收液:1%硼酸水溶液1 000mL,加入0.1%溴甲酚綠乙醇溶液10mL,0.1%甲基紅乙醇溶液7mL,4%氫氧化鈉水溶液0.5mL,混合,置陰涼處保存期為一個月(全自動程序用)。
5 儀器設備
5.1 實驗室用樣品粉碎機或研缽。
5.2 分樣篩:孔徑
5.3 分析天平:感量
5.4 消煮爐或電爐。
5.5 滴定管:酸式,10、25mL。
5.6 凱氏燒瓶:250mL。
5.7 凱氏蒸餾裝置:常量直接蒸餾式或半微量水蒸氣蒸餾式。
5.8 錐形瓶:150、250mL。
5.9 容量瓶:100mL。
5.10 消煮管:250mL。
5.11 定氮儀:以凱氏原理制造的各類型半自動,全自動蛋白質測定儀。
6 試樣的選取和制備
選取具有代表性的試樣用四分法縮減至
7 分析步驟
7.1 仲裁法
稱取試樣0.5~1g(含氮量5~80mg)準確至
將試樣消煮液(
將試樣消煮液(
注:
精確稱取
用
7.2 推薦法
稱取0.5~1g試樣(含氮量5~80mg)準確至
或
采用全自動定氮儀(5.11)時,按儀器本身常量程序進行測定。
采用半自動定氮儀(5.11)時,將帶消化液的管子插在蒸餾裝置上,以25mL硼酸(4.4)為吸收液,加入2滴混合指示劑(4.5),蒸餾裝置(5.7)的冷凝管末端要浸入裝有吸收液的錐形瓶內,然后向消煮管中加入50mL氫氧化鈉溶液(4.3)進行蒸餾。蒸餾時間以吸收液體積達到100mL時為宜。降下錐形瓶,用蒸餾水沖洗冷凝管末端,洗液均需流入錐形瓶內。
用0.1mol/L的標準鹽酸溶液(
8 空白測定
稱取蔗糖
9 分析結果的表述
9.1 計算見下式:
粗蛋白質(%)=(V2-V1)·c×0.0140×6.25/(m×V'/V) ×100
式中:V2── 滴定試樣時所需標準酸溶液體積,mL;
V1── 滴定空白時所需標準酸溶液體積,mL;
c── 鹽酸標準溶液濃度,mol/L;
m── 試樣質量,g;
V── 試樣分解液總體積,mL;
V── 試樣分解液蒸餾用體積,mL;
0.0140── 與1.00mL鹽酸標準溶液〔c(HCl)=1.000mol/L〕相當的、以克表示的氮的質量。
6.25── 氮換算成蛋白質的平均系數。
9.2 重復性
每個試樣取兩個平行樣進行測定,以其算術平均值為結果。
當粗蛋白質含量在25%以上時,允許相對偏差為1%。
當粗蛋白含量在10%~25%之間時,允許相對偏差為2%。
當粗蛋白質含量在10%以下時,允許相對偏差為3%。
圖 凱氏定氮儀
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