蛋白質(zhì)測(cè)定方法

    蛋白質(zhì)測(cè)定方法一般來(lái)說(shuō)，有以下五種：凱氏定氮法，雙縮尿法（Biuret法）、Folin－酚試劑法（Lowry法）、紫外吸收法和考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）。

表 五種蛋白質(zhì)測(cè)定方法的比較

      從以上表格中可以得出，不同的方法有不同的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，如紫外吸收法測(cè)定時(shí)間快。但是綜合起來(lái)，最后一種考馬斯亮藍(lán)法(Bradford法)效率最高，無(wú)論是測(cè)定時(shí)間，靈敏度還是受干擾程度，都是比較占優(yōu)勢(shì)的。

    下面，我們來(lái)重點(diǎn)介紹一下其中一種蛋白質(zhì)測(cè)定方法--凱氏定氮法。

凱氏定氮法（Kjedahl法）

首先將濃硫酸倒入樣品中，邊倒邊搖晃，以使?jié)饬蛩崤c樣品充分接觸，然后加熱試劑。如果你需要加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，可以加入CuSO4作催化劑，這樣，實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)時(shí)間就會(huì)大大縮短。CH₂COOH和H₂SO₄反應(yīng)生成氨氣，然后氨氣又與H₂SO₄發(fā)生作用，固定了氮元素。這時(shí)我們得到了(NH₄)₂SO₄的溶液，然后我們可以用NaOH去跟硫酸銨反應(yīng)，通過(guò)計(jì)算NaOH的使用量，就可以計(jì)算出氮的含量。下面是整個(gè)定氮法中發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)。

    CH₂COOH+ 3H₂SO₄ = 2CO₂ + 3SO₂ +4H₂O +NH₃    (1)

    2NH₃ + H₂SO₄= (NH₄)₂SO₄                       (2)

    (NH₄)₂SO₄ + 2NaOH =2H₂O +Na₂SO₄ + 2NH₃        (3)

       當(dāng)我們得到氮的含量以后，我們就可以通過(guò)一定的計(jì)算，最終算出蛋白質(zhì)的含量。

       凱氏定氮法常用于有機(jī)化合物中的氮含量的測(cè)定，是蛋白質(zhì)含量測(cè)定的經(jīng)典方法，雖然在測(cè)試過(guò)程中，試劑用量很大，但是，不可否認(rèn)，它所適用的樣品范圍之廣，測(cè)試結(jié)果之精確，都是公認(rèn)的。

       現(xiàn)在，隨著科技的發(fā)展，我們已經(jīng)研究出帶消化爐的凱氏定氮儀，它把定氮過(guò)程中的前兩步驟通過(guò)儀器完成，方便了整個(gè)過(guò)程的實(shí)施。凱氏定氮儀能夠自動(dòng)的對(duì)樣品進(jìn)行消化，然后蒸餾，智能化完成，節(jié)省了時(shí)間和精力，提高了工作效率。這種蛋白質(zhì)測(cè)定方法具有有準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便、低耗、穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)。浙江托普儀器有限公司提供這種產(chǎn)品，24小時(shí)服務(wù)熱線：0571-87515059。

  圖 凱氏定氮儀