水盤捕捉瓊脂培養(yǎng)法捕捉孢子操作過程

　　麥類赤霉病的流行具有暴發(fā)性和間歇性，準(zhǔn)確地預(yù)測是搞好防治的基礎(chǔ)。赤霉病的預(yù)測預(yù)報(bào)主要從菌源、麥類生育期、氣候三方面進(jìn)行調(diào)查和綜合分析。而菌源的調(diào)查又分地面稻樁帶菌率調(diào)查和空中孢子捕捉二類。空中孢子捕捉有定量風(fēng)流孢子捕捉器風(fēng)向器捕捉法、電動(dòng)捕捉法和固定式捕捉法、水盤法等使用顯微鏡檢查孢子的方法。以上方法都很費(fèi)時(shí)，且鏡檢技術(shù)難度大，往往不易查到孢子。1978年開始，我們在省農(nóng)科院植保所麥病組的幫助指導(dǎo)下進(jìn)行水盤瓊脂培養(yǎng)法捕捉孢子的試驗(yàn)。通過6年的試驗(yàn)，初步認(rèn)為該方法預(yù)測準(zhǔn)確度高，且省工省力，簡便易行，適宜于縣級以上病蟲觀測站調(diào)查菌量作為短期預(yù)測依據(jù)使用。
　　水盤捕捉瓊脂培養(yǎng)法操作過程
　�。ㄒ唬┡囵B(yǎng)基的制備。將新鮮馬鈴薯（或番薯）洗凈去皮，用天平稱取200克，切成細(xì)顆粒狀，放入鋼精鍋內(nèi)，加水1000毫升，作好標(biāo)記，煮沸半小時(shí)，煮中間可加少量開水，使其總量不少于10的毫升。煮好后用4層紗布過濾，去渣，在馬鈴薯汁液內(nèi)再加瓊脂和白糖各20克，再煮沸使瓊脂全部溶化，中間加適量開水，以制備1000毫升培養(yǎng)基。待瓊脂、自糖全部溶化后，分裝在試管或三角燒瓶中，每管裝18一20毫升左右，試管和三角燒瓶口塞上棉花，包_曰由紙，在高壓鍋或普通鍋內(nèi)蒸煮消毒后待用。
　�。ǘ�）培養(yǎng)皿水盤誘苗。選擇不同類型的6丘小麥田，每丘放水盤1只。水盤系采用經(jīng)過開水消毒煮沸過的直徑為10厘米的培養(yǎng)皿，用特種鉛筆寫上號碼或在底座上貼上小標(biāo)簽，用20毫升針筒注入無菌水，每個(gè)培養(yǎng)皿6一7毫升，使皿底鋪遍，于傍晚4時(shí)放到麥田誘菌臺上，次日上午8時(shí)取回。
　　誘菌臺前選年用少_堆制，高度離地面80厘米左右，土堆頂上平放1塊15×15厘米的玻璃，上用3根小竹支撐一頂直徑為70厘米大笠帽作防雨罩。防雨罩高出地面130厘米。近2年改用舊毛竹上釘一木板，毛竹埋入土下50一60厘米，其它距離與上述相同。
　�。ㄈ�）菌落的塔養(yǎng)。取制備好的培養(yǎng)基試管經(jīng)煮溶后，放入溫水中使培養(yǎng)基慢慢冷卻，以不燙手為度。培養(yǎng)皿誘菌水中加入2滴硫酸雙氫鏈霉素（50萬單位硫酸雙氫鏈霉素加5、毫升蒸餾水，放在眼藥水瓶中備用），搖勻，再加入冷卻（45℃左右）的培養(yǎng)基，迅速在臺板玻璃上搖平搖勻，蓋上培養(yǎng)皿蓋，倒放在26℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)3天。觀察計(jì)數(shù)玫瑰紅色茵落的數(shù)量。
　　試驗(yàn)結(jié)果和討論
　　根據(jù)1978一1983年6年應(yīng)用水盤瓊脂培養(yǎng)法捕捉空中孢子預(yù)測麥類赤霉病的結(jié)果，初步得出以下結(jié)論：
　�。ㄒ唬┧�盤捕捉瓊脂培養(yǎng)法省工省力，方法較為簡便，比電動(dòng)孢子捕捉器捕捉子囊孢子的方法（我站使用3年）優(yōu)越。它可根據(jù)赤霉病菌產(chǎn)生玫瑰紅色菌落的多少計(jì)數(shù)，不用顯微鏡檢查，也不會(huì)漏掉捕到的孢子數(shù)，消毒滅菌要求不高，即便有雜菌生長，也不影響檢查，因此易于普及推廣。
　　（二）水盤瓊脂培養(yǎng)法用來捕捉空中孢子預(yù)測小麥赤霉病的準(zhǔn)確程度高。根據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，小麥?zhǔn)蓟ㄆ谇?0天和4月上旬平均每盤菌落數(shù)與小麥赤霉病穗發(fā)病率的相關(guān)性達(dá)極顯著和顯著水準(zhǔn)，對小麥赤霉病的短期預(yù)測有明顯的作用（表1）。而用電動(dòng)孢子捕捉器捕捉，我們進(jìn)行了3年，捕到孢子極少，根本無法預(yù)測；稻樁帶菌率調(diào)查進(jìn)行了7年，初步認(rèn)為稻樁帶菌率的高低與當(dāng)年大田麥類赤霉病發(fā)生程度沒有相關(guān)性，故不能作為預(yù)測流行與否的根據(jù)。
　　1. 小麥?zhǔn)蓟ㄇ?0天平均每盤菌落數(shù)與小麥赤霉病穗發(fā)病率關(guān)系，用6年資料統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果，相關(guān)性極顯著（r=0.9563關(guān)關(guān)）。
　　表1水盤捕捉瓊脂培養(yǎng)法誘菌量與小麥赤霉病發(fā)病程度的關(guān)系

　　以y為小麥赤霉病穗發(fā)病率（%），x1為小麥?zhǔn)蓟ㄇ?0天平均每盤菌落數(shù)，其預(yù)測式為：
　　y=0.09757x1一4.182±2.806
　　根據(jù)該式判別小麥?zhǔn)蓟ㄇ?0天平均每盤菌落數(shù)在100個(gè)以下的，小麥赤霉病為極輕年，一般不必進(jìn)行第2次藥治；在100一250個(gè)的為輕發(fā)年，部分小麥田應(yīng)治第2次，在250個(gè)以上的為中發(fā)年，應(yīng)治第2次。所以該式可用于決定小麥?zhǔn)欠裥枰�進(jìn)行第2次藥治。
　　2. 4月上旬平均每盤菌落數(shù)與小麥赤霉病穗發(fā)病率關(guān)系，用6年資料統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果，相關(guān)性達(dá)顯著水準(zhǔn)（r=0.5225）。以y為小麥赤霉病穗發(fā)病率（腸），x1為4月上旬平均每盤菌落數(shù)，其預(yù)測式為：
　　y=0.1697x1一4.739±5.459
　　我縣小麥?zhǔn)蓟ㄆ诩吹趇次防治適期在4月15日左右，·所以該式可用來短期預(yù)測小麥赤霉病的發(fā)病程度，指導(dǎo)第1次防治工作。
　　3. 根據(jù)6年水盤捕捉瓊脂培養(yǎng)法的試驗(yàn)結(jié)果，其中5年孢子高峰日在小麥?zhǔn)蓟ㄇ昂�，這5年小麥發(fā)病都重于大麥；而1981年情況特殊，孢子高峰日與大麥齊穗期吻合，且4月12日開始幾乎沒有捕到孢子，所以1981年大麥穗發(fā)病率達(dá)5.7%,而小麥穗發(fā)病率僅0.78%。這對分析菌量和病害的關(guān)系很有說服力。
　　3月21日至4月20日合計(jì)平均每盤誘菌量與小麥赤霉病發(fā)病率的關(guān)系，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析未達(dá)顯著水準(zhǔn)，但相關(guān)性較好。1978一1981年4年誘菌量均在200個(gè)以下，病害發(fā)生為極輕年份；1982一1983年2年誘菌量在300個(gè)以上，病害發(fā)生為輕發(fā)到中等偏輕年份。