飼料中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的測定

      采用范氏（Van Soest）的洗滌纖維分析法測定中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維原理:植物性飼料經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理，不溶解的殘渣為中性洗滌纖維，主要為細(xì)胞壁成分，其中包括半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。中性洗滌纖維經(jīng)酸性洗滌劑處理，剩余的殘渣為酸性洗滌纖維，其中包括纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。酸性洗滌纖維經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣為木質(zhì)素和硅酸鹽，從酸性洗滌纖維值中減去72%硫酸處理后的殘渣為飼料的纖維素含量。將72%硫酸處理后的殘渣灰化，在灰化過程中逸出的部分為酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）的含量。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，或者是食品界，尤其是快速測定時，我們通常不選擇實(shí)驗(yàn)室方法來測定，而是選擇快速測定法，即直接用儀器如纖維測定儀。纖維測定儀利用酸堿消煮法來進(jìn)行測定，有時又叫做粗纖維測定儀，因?yàn)闇y定的物質(zhì)中不僅含有纖維，還含有木質(zhì)素等其他物質(zhì)，因此被稱為粗纖維。

      試劑的配制：中性洗滌劑（3%十二烷基硫酸鈉）：準(zhǔn)確稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉（EDTA，C10H14O8Na22H2O，分析純）和6.8g硼酸鈉（Na2B4O7?10H2O，分析純）放入燒杯中，加入少量蒸餾水，加熱溶解后，再加入30g十二烷基硫酸鈉（C12H25NaO4S，分析純）和10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析純）；再稱取4.56g無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4，分析純）置于另一燒杯中，加入少量蒸餾水微微加熱溶解后，倒入前一個燒杯中，在容量瓶中稀釋至1000ml，其中pH值約為6.9~7.1（pH值一般勿需調(diào)整）；1N硫酸：量取約27.87ml濃硫酸（分析純，比重1.84，98%），徐徐加入已裝有500ml蒸餾水的燒杯中，冷卻后注入1000ml容量瓶定容，標(biāo)定；酸性洗滌劑（2%十六烷三甲基溴化銨）：稱取20g十六烷三甲基溴化銨（CTAB，分析純）溶于1000ml1N硫酸，必要時過濾。

      操作步驟：中性洗滌纖維測定.準(zhǔn)確稱取1.0000g樣品（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml中性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在5~10min內(nèi)煮沸，并持續(xù)保持微沸60min。煮沸完畢后，取下直筒燒杯，將燒杯中溶液倒入安裝在抽濾瓶上的已知重量的玻璃坩堝中進(jìn)行過濾，將燒杯中的殘渣全部移入，并用沸水沖洗玻璃坩堝與殘渣，直洗至濾液呈中性為止。用20ml丙酮沖洗二次，抽濾。將玻璃坩堝置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷卻30min稱重，直稱至恒重。酸性洗滌纖維測定。準(zhǔn)確稱取1g樣品（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml酸性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在5~10min內(nèi)煮沸，并持續(xù)保持微沸60min。趁熱用已知重量的玻璃坩堝抽濾，并用沸水反復(fù)沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止。用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為止，并抽凈丙酮。將玻璃坩堝置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷卻30 min稱重，直稱至恒重。酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分（AIA）測定：將酸性洗滌纖維加入72%硫酸，在20℃消化3h后過濾，并沖洗至中性。消化過程中溶解部分為纖維素，不溶解的殘渣為酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分，將殘渣烘干并灼燒灰化后即可得出酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分的含量。

      結(jié)果計算：中性洗滌纖維含量的計算：NDF（%）=（W1－W2）/W×100;式中：W1—玻璃坩堝和NDF重（g）；W2—玻璃坩堝重（g）；W—試樣重（g）；酸性洗滌纖維含量的計算：ADF（%）=（G1－G2）/G×100；式中：G1—玻璃坩堝和ADF重（g）；G2—玻璃坩堝重（g）；W—試樣重（g）。半纖維素含量的計算：半纖維素（%）=NDF（%）－ADF（%）；纖維素含量的計算：纖維素=ADF（%）－經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣（%）；酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）含量的計算：ADL（%）=殘渣（%）－灰分（硅酸鹽，%）。