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果汁中總糖的測定方法
糖果—還原糖的測定
1.直接滴定法
2 原理
樣品經(jīng)除去蛋白質(zhì)后,在加熱條件下,直接滴定標(biāo)定過的堿性酒石酸銅液,以次甲基藍(lán)作指示劑,根據(jù)樣品液消耗體積,計(jì)算還原糖量。
3 試劑
3.1 堿性酒石酸銅甲液
稱取15g硫酸銅(CuSO4•5H2O)及0.05g次甲基藍(lán),溶于水中并稀釋至1000mL。
3.2 堿性酒石酸銅乙液
稱取50g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉,溶于水中,再加入4g亞鐵氰化鉀,完全溶解后,用水稀釋至1000mL,貯存于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)。
3.3 乙酸鋅溶液
稱取21.9g乙酸鋅,加3mL冰乙酸,加水溶解并稀釋至100mL。
3.4 亞鐵氰化鉀溶液(10.6+89.4)
稱取10.6g亞鐵氰化鉀,加水溶解并稀釋至100mL。
3.5 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1mg/mL)
精密稱取1.000g經(jīng)過98~100℃干燥至恒量的純葡萄糖,加水溶解后加入5mL鹽酸,并以水稀釋至1000mL。此溶液每毫升相當(dāng)于1mg葡萄糖。
3.6 鹽酸
4 儀器
4.1 實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器和設(shè)備
4.2 古氏坩堝或G4垂融坩堝
5 操作步驟
5.1 樣品處理
將樣品搗碎混勻待用,樣品應(yīng)避免暴露在空氣和陽光下,并盡可能迅速地進(jìn)行分析。
稱取約2.5~5g樣品,置于250mL容量瓶中,加50mL水,搖勻后慢慢加入乙酸鋅溶液5mL及亞鐵氰化鉀溶液(10.6+89.4)5mL,加水至刻度,混勻。靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,濾液備用。
5.2 標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液
吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液,置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,從滴定管滴加約9mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,控制在2min內(nèi)加熱至沸,趁沸以每兩秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn),記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積,同時(shí)平行操作三份,取其平均值,計(jì)算每10mL(甲、乙液各5mL)堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量(mg)。
5.3 樣品溶液預(yù)測
吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液,置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,控制在2min內(nèi)加熱至沸,趁沸以先快后慢的速度,從滴定管中滴加樣品溶液,并保持溶液沸騰狀態(tài),待溶液顏色變淺時(shí),以每兩秒1滴的速度滴定,直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn),記錄樣液消耗體積。
5.4 樣品溶液測定 1
吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液,置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,從滴定管滴加比預(yù)測體積少1mL的樣品溶液,使在2min內(nèi)加熱至沸,趁沸繼續(xù)以每兩秒1滴的速度滴定,直至藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn),記錄樣液消耗體積,同法平行操作三份,得出平均消耗體積。
6 結(jié)果計(jì)算
按下式計(jì)算糖果中還原糖的含量: 100100025021×××=VmmX
式中:X—樣品中還原糖的含量(以葡萄糖計(jì)),%;
m1—10mL堿性酒石酸銅溶液(甲、乙液各5mL)相當(dāng)于還原糖(以葡萄糖計(jì))的質(zhì)量,mg;
m2—樣品質(zhì)量,g;
V—測定時(shí)平均消耗樣品溶液體積,mL。
7 精密度
同一樣品兩次平行測定值相對差不得超過15%。
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