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葉斑病菌孢子在人工氣候培養(yǎng)箱中的培育研究
膠胞炭疽菌引起的芒果炭疽病是嚴重影響芒果產(chǎn)量和質(zhì)量的重要病害之一。葉斑類植物病害葉部病斑的擴展是寄主、病原物和環(huán)境三者共同作用的結(jié)果,體現(xiàn)了病害嚴重性程度,病斑擴展快反映了病害危害程度大,病害擴展慢則反映了病害危害程度小。影響病斑擴展的因素有多個方面,包括品種抗病性、有效積溫、溫度、相對濕度、礦質(zhì)元素和土壤肥力等因素,不同因素對不同病斑擴展的影響已有研究。病害大面積的暴發(fā)流行與適宜的發(fā)病環(huán)境是分不開的,充分研究發(fā)病因素對病害發(fā)展的影響是科學管理植物病害的前提條件。少有芒果炭疽病病斑擴展影響因素的研究報道。通過離體葉片接種法研究了接種體分生孢子濃度、芒果抗病性、溫度、相對濕度和光照等因素對芒果炭疽病病斑擴展的影響,旨在揭示影響芒果炭疽病病斑擴展的主要因素,了解芒果炭疽病發(fā)生發(fā)展規(guī)律。人工氣候培養(yǎng)箱在研究過程中發(fā)揮重要的作用。
選取大小一致的芒果淡綠色葉片5片,在葉片背而選取3個側(cè)脈與側(cè)脈之間的葉肉部位應用束針刺傷葉片,接種分生抱子懸浮液10},L,濃度為4x105個/mL。以清水處理為對照。放置于280C,100%濕度保濕、黑暗條件的人工氣候培養(yǎng)箱中培養(yǎng),采用十字交叉法測量病斑直徑。病原菌分生抱子濃度對病斑擴展的影響采用血球計數(shù)板計數(shù)法將供試分生抱子懸浮液配置成4x10',4x106,4x105,4x104,4x10;,4x102個//mL共6個濃度梯度。采用離體葉片接種法,接種48,72,96h后測量病斑直徑。每個處理重復15次,所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析均采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進行Duncan多重新復極差法分析。設(shè)置全光照(日光燈,15W),12h黑暗++12h光照(日光燈,15W)和全黑暗共3種光照條件。采用離體葉片接種法,分生抱子濃度4x105個/mL。將葉片置于不同光照條件下,28℃人工氣候培養(yǎng)箱中培養(yǎng),葉片與光源的垂直距離為30,100%濕度保濕,96,120,144h后測量病斑的直徑,進行統(tǒng)計分析。
利用人工氣候培養(yǎng)箱綜合分析孢子濃度對病斑擴展影響數(shù)據(jù)表明,不同濃度分生孢子在成功侵染并達到顯癥后,病斑擴展速度較為一致,48~72h時病斑的平均擴展速度為4.4mm/24h,而7296h時病斑的平均擴展速度為6.0mm/24h,這說明隨時間增加病斑的擴展速度有加快趨勢。4xlOZ個/mL接種點接種量10},L,故所接種的分生抱子個數(shù)約為4個,體現(xiàn)了該病菌高致病力特性。田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)在芒果開花結(jié)果及抽出嫩葉之前,越冬落葉、枯枝、葉片及枝條已存在大量菌源,因此,接種體數(shù)量是影響病斑擴展的次要因素之一。
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