蛋白質(zhì)測定方法的比較

蛋白質(zhì)的定量，是生物化學(xué)中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有以下幾種方法：定氮法、紫外吸收法、Lowry法（Folin-酚試劑法）、Bradford法（考馬斯亮藍(lán)法）、BCA法等：

定氮法比較繁復(fù)，但較準(zhǔn)確，往往以定氮法測定的蛋白質(zhì)作為其他方法的標(biāo)準(zhǔn)蛋白。
紫外吸收法簡便、靈敏、快速，不消耗樣品，測定后樣品仍能回收利用。缺點(diǎn)是準(zhǔn)確度較差，干擾物質(zhì)多，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定蛋白質(zhì)含量時(shí)，對于那些與標(biāo)準(zhǔn)蛋白中酪氨酸和色氨酸含量差異大的蛋白質(zhì)，有一定的誤差。
Lowry法是較早發(fā)展的一種靈敏的檢測方法，最低靈敏度為5微克，通常測定范圍20－250微克。優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高，缺點(diǎn)是費(fèi)時(shí)較長，要精確控制操作時(shí)間，標(biāo)準(zhǔn)曲線不是嚴(yán)格的直線形式，且專一性差，干擾物質(zhì)較多。
Bradford法是靈敏度更高的一種方法，優(yōu)點(diǎn)有：靈敏度高，比lowry法高4倍左右，最低檢測達(dá)1－5微克；測定快速、簡便，染色穩(wěn)定；干擾物質(zhì)少。確點(diǎn)是用于不同蛋白質(zhì)測定時(shí)有較大的偏差；仍有干擾，如SDS、去污劑、Triton x100等；標(biāo)準(zhǔn)曲線有輕微的非線性。